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SRB检测试剂盒在操作性上更显便利
发布时间:2019-01-15   点击次数:72次
   SRB又称硫酸盐还原菌,是一种厌氧的微生物,广泛存在于土壤、海水、河水、地下管道以及油气井等缺氧环境中,据统计,目前,硫酸盐还原菌已有12个属40多个种, 从生理学上分为两大类,分别是:
  1、Ⅰ类:如脱硫弧菌属、脱硫单胞菌属、脱硫叶菌属和脱硫肠状菌属,其特点是可利用乳酸、丙酮酸、乙醇或某些脂肪酸为碳源及能源,将硫酸盐还原为硫化氢;
  2、Ⅱ类:如脱硫菌属、脱硫球菌属、脱硫八叠球菌属和脱硫线菌属,它们的特别之处是可以氧化脂肪酸,并将硫酸盐还原为硫。现在,随着研究的进展,陆续又有一些新的种属被命名。
  SRB检测的操作步骤说明:
  1、细胞固定:药物作用时间终点时,每孔加入50μL4℃预冷的TCA溶液(30%,w/v)固定细胞,TCA溶液的终浓度为10%。静置5 min移入4℃冰箱中固定1h,取出用去离子水冲洗5遍,室温晾干。
  2、染色:待96孔板室温下晾干后,每孔加入0.4%(w/v)的SRB染液(1%的乙酸配制)70μL,染色30 min后倒掉染液,用1%(v/v)乙酸冲洗4次,去除未结合的染料,室温晾干。
  3、检测:用100μL非缓冲Tris-base碱液(10mM,pH=10.5)溶解与细胞蛋白结合的染料,水平摇床上振荡20min,采用酶标仪540nm处测定光吸收值。操作中,应注意洗除染料时操作需迅速,避免用移液器吸取液体,防止动作过慢造成与细胞蛋白结合的染料解吸附。
  SRB检测试剂盒是一种采用酶免疫方法进行快速检测硫酸盐还原菌(SRB)的设备,采用了高纯度的抗体来探测腺苷-5’-磷酰磺酸酯酶(APS),这种还原酶是所有SRB菌株拥有的共同特征,SRB检测试剂盒的优势在于高纯度的抗体附着在小颗粒上选择性的捕捉APS还原酶。小颗粒和捕捉到的还原酶被隔离到多孔膜当中,在表面形成反应层,并且变蓝,表征了APS还原酶的存在数量,每个试剂盒包括了全部必须的用来检测SRB的材料。无需预处理或者稀释待测样品,而且没有任何特殊的危险废物产生。

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